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让微球给光聚焦,神经调控能否少用一点光?

Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · 2022-02-20

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Advanced Science · 研究前沿

让微球给光聚焦,神经调控能否少用一点光?

提高光的利用效率,可以从它怎样分布开始。研究用微球产生局部集中的光场,在细胞、脑片与小鼠中观察到更强的光响应,为降低入射光需求提供概念验证。

原论文图1H局部:微球附近的实验光场

用光调节神经活动时,光到了目标附近,还会继续散开,也会被组织吸收。想让细胞产生足够响应,是否只能把光开得更强?2022年2月20日发表于 Advanced Science 的研究,尝试了另一种思路:借助微小透明球体的聚光作用,让部分光能集中在邻近区域。这个被称为“光子纳米射流”的局部光场,在研究中增强了光敏细胞的电流、脑片中的神经响应,以及小鼠运动皮层刺激相关的行为变化。故事的重点,是重新安排光的去向,而不只是增加送进去的光。

关键发现

微球聚光能够在特定条件下增强光遗传响应。证据跨越光场、细胞电流、脑片活动与小鼠行为,显示利用局部光分布的潜力;长期相容性、非靶向影响和临床用途仍待进一步验证。

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一个微球,改变局部光场的分布

研究将微球看作一个微型透镜。没有微球时,入射光沿传播方向逐渐发散;有微球时,背光一侧出现更集中的区域。数值模拟与实验光场成像都支持这种局部聚光现象,为后面观察细胞响应提供了物理基础。

这种增强并不是在任何位置都一样。微球的大小、所在位置与光源的相对距离,都会影响光场;模拟中的最佳表现与实验也有小幅差别。研究呈现的是特定条件下的聚光能力,局部集中不意味着整片组织都获得同等增强。

光场更集中,是这条证据链的起点。它能否转化成更大的细胞电流,能否再影响神经元放电与动物行为,还要逐层观察。研究随后把这些不同尺度的读出接起来,让光学变化与生物学响应之间的联系逐步清晰。

原论文图 1微球周围的模拟与实测光场
微球周围的模拟与实测光场
图1比较有无微球的光场,并展示聚光表现随相关光学条件变化。光场增强本身与神经细胞响应分别测量。
来源:Guo J et al. · Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · CC BY
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同样的入射条件,细胞电流可以更强

研究先在表达光敏通道的培养细胞中观察到,有微球时光诱发内向电流增强;随后在原代海马神经元中也发现类似现象。前一组是用于研究通道响应的细胞体系,后一组才是神经元,两个层面的结果相互补充。

增强幅度会随着入射光强变化,并不是一条不断向上的直线。某些较低光照条件下,神经元更容易产生动作电位;光照足够强时,有无微球的成功率则接近。对于已经接近饱和的响应,再聚集更多光能未必换来同样大的收益。

原论文图 2培养细胞和神经元的电流与放电响应
培养细胞和神经元的电流与放电响应
图2区分通道细胞体系与原代神经元,比较电流和动作电位响应。较高光照下的趋同,体现了条件依赖。
来源:Guo J et al. · Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · CC BY
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脑片中的信号,也出现了增强

脑组织比培养皿中的单个细胞更复杂:光会遇到多种结构,细胞之间也有网络联系。脑片研究因此同时观察钙信号、电极记录和细胞膜电位。有微球时,多个读出指标显示出更强的光响应,让证据向组织层面推进。

各指标的变化也有自己的条件。较低光照下,多数细胞的钙响应仍有限;较高条件下,钙信号增强更清楚。电记录则在所比较的条件中呈现更多放电。这些结果相互支持,同时保留了“哪一种读出、在哪种条件下”的具体区别。

原论文图 3脑片中的钙信号与电活动
脑片中的钙信号与电活动
图3汇集脑片钙成像和两类电记录结果,呈现不同光照条件中的响应。
来源:Guo J et al. · Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · CC BY
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较低光照时,小鼠运动响应更容易显露

研究进一步观察运动皮层相关的行为。在较低的光照条件下,无微球小鼠在开灯前后没有明显运动变化,而有微球组的运动距离和平均速度增加。提高光照后,两组都出现运动增强,表现出局部聚光与入射强度之间的联系。

活动相关标记也在较低光照的有微球组更高,为行为观察提供了组织层面的支持。这里的结果是特定运动皮层条件下的响应增强,既不是运动障碍治疗试验,也没有证明所有脑区、所有光敏通道都能按相同比例降低光需求。

原论文图 4小鼠运动与局部活动标记
小鼠运动与局部活动标记
图4比较开关光条件中的运动表现,以及相应区域的活动标记;较低和较高光照下的响应模式不同。
来源:Guo J et al. · Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · CC BY
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把光集中起来,还需要回答材料与空间问题

减少入射光需求,是这项策略的重要动机;能否同时减少非靶向影响,还需要对邻近细胞和组织进行专门比较。研究中使用的微球是外来材料,长期留在脑内的相容性、分布和稳定性,也不能由短期响应增强直接推定。

这项工作仍需要光纤等侵入性光输送,并没有变成从体外直接照亮深部脑区的技术。局部聚光解决的是光已经到达附近之后如何被利用,光怎样进入组织,是相邻但不同的一道问题。

提高效率,也可以从光路本身寻找答案

从光场到电流,从脑片到行为,这项概念验证提示:光遗传响应不仅取决于细胞表达了什么,也取决于光怎样分布。把光学结构与神经响应放在一起研究,为更精细地理解和利用光能提供了方向;距离长期可靠应用,仍需要更多材料、空间选择性和生物学证据。

论文信息

Guo J, Wu Y, Gong Z, Chen X, Cao F, Kala S, Qiu Z, Zhao X, Chen JJ, He D, Chen T, Zeng R, Zhu J, Wong KF, Murugappan S, Zhu T, Xian Q, Hou X, Ruan YC, Li B, Li YC, Zhang Y, Sun L.
Photonic Nanojet-Mediated Optogenetics
Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) · 2022-02-20
DOI: 10.1002/advs.202104140